İmmünohistokimya (IHC), bir doku örneğindeki antijenleri tespit etmek için antikorları kullanır. Bir patoloğun biyopsi sonrasında hastalık belirtilerini kontrol etmek için kullanabileceği bir laboratuvar tekniğidir. IHC, genellikle kanseri teşhis etmek, tedavi yanıtını tahmin etmek ve hastalığın olası sonuçlarını (prognoz) belirlemek için kullanılır.

Genel bakış

İmmünohistokimya (İHK) nedir?

İmmünohistokimya (IHC), patologların bir doku örneğinde hastalık belirtileri aramak için kullandıkları bir laboratuvar tekniğidir. Bir patolog, tıbbi durumları teşhis etmek için laboratuvar testlerini kullanır.

Teşhisinizin bir parçası olarak, bir sağlık hizmeti sağlayıcısı dokuyu çıkarabilir ve test için bir laboratuvara gönderebilir. Örneğin, bir tümörün bir kısmını çıkarabilir ve kanser hücrelerini test etmek için bir laboratuvara gönderebilirler. Buna biyopsi denir . IHC, bir patoloğun numuneyi laboratuvara ulaştığında incelemek için kullanabileceği yöntemlerden sadece biridir.

IHC, en yaygın immün boyama türüdür. İmmün boyama, bir doku örneğinin parçalarını “etiketlemek” için antikorlar ve özel belirteçler kullanmayı içerir, böylece patologların tanımlaması daha kolay olur.

“İmmünhistokimya” kelimesi, bu konuda ipuçları veriyor:

• İmmüno, bağışıklık sisteminizle ilgili anlamına gelir . Bağışıklık sisteminiz vücudunuzdaki maddeleri ( antijenler olarak adlandırılır) algılar. Patojenler ( virüsler , bakteriler , mantarlar ve parazitler ) ve kanser hücreleri gibi ait olmadıkları antijenleri bulmak ve yok etmek için antikorlar üretir . Bir IHC, bir doku örneğindeki antijenleri tespit etmek ve yakalamak için antikorların antijen bulma özelliklerini kullanır. Antikorlar örneği boyar, böylece patolog mikroskop altında görüntülendiğinde bağlı oldukları antijenleri görebilir.
• Histo doku anlamına gelir. IHC bir doku örneğini inceler.
• Kimya , insan dokusu da dahil olmak üzere tüm maddeleri oluşturan minik yapı taşlarını inceler. Bir IHC, hastalıkları gösterebilecek, aksi takdirde görünmez antijenleri görmek için mikroskop kullanır.

İmmünohistokimya ne zaman yapılır?

IHC şu amaçlarla kullanılabilir:

• Bir durumu teşhis edin : Bir IHC, sağlık hizmeti sağlayıcılarının kanser gibi durumları teşhis etmesine olanak tanır . Sağlayıcıların kanser türünü (örneğin, karsinom , melanom veya sarkom ) belirlemesine yardımcı olabilir. Ayrıca sağlık hizmeti sağlayıcılarının yayılan kanserin ( metastatik kanser ) kökenlerini belirlemesine olanak tanır .
• Prognozu belirleyin : Bir IHC, bir kanserin ne kadar yüksek riskli veya agresif olduğunu belirleyebilir. Ayrıca, sağlayıcıların kanseri evrelemesine ve derecelendirmesine yardımcı olabilir . Bu bilgiler, sağlayıcıların tedavi için en iyi seçenekleri belirlemesine yardımcı olabilir.
• Tedavi yanıtını tahmin edin : Bir IHC, kanserin tedaviye nasıl yanıt verebileceği hakkında ipuçları sağlayan tümör dokusunun özelliklerini belirleyebilir. Örneğin, patologlar östrojen ve testosteron gibi belirli hormonların varlığında büyüme olasılığı olan meme ve prostat kanserlerini belirleyebilir . Bu kanserler, bu hormonları bloke eden tedavilere ( hormon tedavisi ) en iyi şekilde yanıt verebilir.
• Tedaviye yanıtın izlenmesi : IHC, sağlayıcıların tedavilerin vücudunuzu hastalıktan kurtarmada işe yarayıp yaramadığını izlemelerine olanak tanır.

Araştırmacılar ayrıca yeni ilaç tedavileri geliştirmek için IHC uygularlar. IHC, araştırmacıların hücreleriniz ve içlerindeki moleküller gibi vücudunuzun en küçük parçalarının nasıl çalıştığı hakkında daha fazla bilgi edinmelerine yardımcı olur. IHC, hastalıkların bu süreçleri nasıl etkilediği ve hangi tedavilerin yardımcı olabileceği konusunda fikir verir.

İmmünohistokimya ile hangi hastalıklar teşhis edilebilir?

Sağlık hizmeti sağlayıcıları IHC’yi en çok kanseri teşhis etmek için kullanırlar, ancak Alzheimer hastalığı , Parkinson hastalığı ve kas distrofisi de dahil olmak üzere diğer rahatsızlıkları da teşhis edebilir .

Enfeksiyona neden olan patojenleri de tanımlayabilir. İlk başarılı IHC boyama, araştırmacıların (Coons ve diğerleri) bir doku örneğinde pnömoni ile ilişkili bakteriyi ( pnömokok ) tanımladığı 1941 yılında gerçekleşti.

Test Detayları

Test nasıl çalışıyor?

IHC, bir doku örneğinde hedef antijeni tespit etmek için antikorlar kullanır . Hedef antijen, belirli bir hastalığın mevcut olduğunu gösteren bir belirteçtir. Antikor antijeni tanırsa, ona bağlanır (bağlanır). Bağlanma süreci bir kilit (antijen) ve anahtara (antikor) benzer. Antikor antijene bağlanırsa, doku örneği mikroskop altında görüntülendiğinde belirli bir renge boyanır.

Bu şöyle çalışır:

• Bir patolog, antikoru , antikor hedef antijene bağlandığında tepkimeye girecek bir enzime bağlar .
• Hedef antijen mevcutsa antikor ona bağlanır.
• Bağlanma enzimin reaksiyona girmesine neden olur.
• Reaksiyon, mikroskop altında incelendiğinde doku örneğinin belli bir renkte boyanmasına neden olur.

Sonuçların güvenilir olabilmesi için patologların birden fazla adımı doğru bir şekilde tamamlamaları gerekir.

Numunenin hazırlanması

Örneğin hazırlanması, doğru şekilde boyanmasını sağlar. Bir antijen mevcutsa, arka plana karşı renkli segmentlerde öne çıkar. Örneği hazırlamak için patologlar:

1. Dokuyu koruyun . Doku, zamanla ölen hücrelerden oluşur. Dokuyu korumak veya “düzeltmek” süreci yavaşlatır. Sabitleme, dokunun yapısını korur, böylece etkili bir şekilde boyanır. Dokuyu düzeltmek için kullanılan en yaygın maddelerden biri formalindir, bir formaldehit çözeltisidir.
2. Antijenlerin erişilebilir olduğundan emin olun . Sabitleme süreci bazen antijenin bazı kısımlarını bloke edebilir, böylece antikor ona bağlanamaz. Antijen geri kazanımı adı verilen bir süreç, antijenin bağlanma noktalarını yeniden açığa çıkarabilir, böylece antikorlar bağlanabilir.
3. Bir antikorun bağlanabileceği benzer yapıları bloke edin . Bazen antikorlar, hedef antijene yapı olarak benzer maddelere bağlanır — ancak aynı değildir. Patologlar bu yapıları önceden bloke eder, böylece antikor yalnızca hedef antijene bağlanır.

Antikorların seçilmesi

Patologlar hedef antijene bağlandığı bilinen antikorları seçerler. IHC poliklonal antikorlar veya monoklonal antikorlar kullanır .

• Poliklonal antikorlar : Farklı antikorların bir karışımı. Bu antikorlar bir antijen üzerindeki birden fazla bağlanma bölgesine bağlanabilir.
• Monoklonal antikorlar : Aynı antikorun özdeş kopyaları. Monoklonal antikorlar yalnızca antijen üzerindeki belirli bir bağlanma bölgesine bağlanır.

Antijenin tespiti

Patologlar antijeni içeren dokuyu boyamak için antikoru hazırlarlar.

Patologlar:

1. Antikorları bir enzime bağlayın. Enzim örnekleri arasında yaban turpu peroksidaz ve alkalin fosfataz bulunur.
2. Doku örneğine enzimli antikoru ekleyin.
3. Örneği mikroskop altında inceleyin.
4. Antijenin mevcut olduğunu gösteren boyanmayı arayın.

İlk başarılı IHC benzer bir işlem kullandı. Araştırmacılar antikoru bir enzime bağlamak yerine onu bir florofora bağladılar. Bir florofor ışığı emer ve yansıtır. Florofor, bir floresan mikroskobu altında görüntülendiğinde örneği boyar. Bu teknik artık immünofloresan adı verilen farklı bir immünboyama türü olarak kabul ediliyor.

İmmünohistokimyanın sınırlamaları nelerdir?

İmmünohistokimyadaki her adım için standart yönergeler yoktur. Farklı laboratuvarlar farklı teknikler kullanır, bu da sonuçların değişebileceği anlamına gelir.

Ayrıca, yakın zamanda yapılan araştırmalar, IHC için mevcut tüm antikorların, yapması gerekeni yapmadığını, yani bir numunedeki hedef antijeni tespit etmediğini göstermiştir. Antikorlarda sorunlar varsa, bir test yanlış sonuçlar verebilir, bunlara şunlar dahildir:

• Yanlış pozitif : IHC, mevcut olmayan bir antijeni tespit eder .
• Yanlış negatif : IHC, mevcut bir antijeni tespit etmez .

Laboratuvarlarda her adımın dokuyu koruması ve yüksek kaliteli bir boyama sağlaması için kalite kontrolleri olmalıdır. IHC doğruluğunu artırmak için patologlar, bilinmeyen bir doku örneğini test etmeden önce boyandığından emin olmak için hedef antijeni içerdiği bilinen dokudaki antikorları test edebilir.

İmmünohistokimya ne kadar doğrudur?

Doğru şekilde ve yerinde kalite kontrolleri ile gerçekleştirildiğinde, immünohistokimya kanser teşhisi için güvenilir bir yöntemdir. Bir çalışma, IHC’nin metastatik kanserin birincil yerini %70 ila %90 doğrulukla doğru bir şekilde belirleyebileceğini bildirmektedir.

Ek Ayrıntılar

İmmünohistokimya bir biyopsi midir?

Hayır, ama birbirleriyle ilişkilidirler. İmmünohistokimya, bir patoloğun biyopsi için toplanan bir doku örneği üzerinde uygulayabileceği bir laboratuvar tekniğidir.

Benim Sağlığım’dan bir not

İmmünohistokimya (IHC), patologların olağanüstü bir şey başarmalarını sağlar. Çıplak gözle görülemeyen hastalık belirtilerini görmelerini sağlar. IHC, vücudunuzun güçlü savaşçıları olan antikorları kullanarak hastalığa neden olan zararlı, mikroskobik maddeleri açığa çıkarır. Bilim insanlarının laboratuvarda kanseri incelemesine, teşhis etmesine ve en önemlisi onunla savaşmasına olanak tanıyan yöntemlerden sadece biridir.